往年，隨著《化妝品監視管理條例》、《化妝品分類規則和分類目錄》和《化妝品成效宣稱評價規范》等新法規的先后公布和實施，對整個行業的迷信安康、有序開展提出了更高的詳細要求，在產品的平安性、評價要求和成效宣稱方面都制定了相應的規范。

近日，圍繞新法規下企業關心的成效評價方面的效果，博溪生物總經理盧永波在由聚美麗主辦的“2021化妝品產學研醫技術論壇”宣布了《新規下化妝品成效評價與檢測》主題演講，經過火享一系列成效評價的案例，并給出相關處置方案。

這是化妝品成效評價與檢測的一線總結，在快速開展的市場環境以及新規下，不論是啟用3D皮膚模型等實驗室方法，還是運用分子生物學的方法，在這套技術體系里對行業規范或許企業都有自創意義。

本文是此次演講的局部精髓內容，經盧永波自己審核。

我們不時從事皮膚3D模型和相關測試工具的開發，同時，也樹立了一系列用于化妝品平安和成效測試的方法體系。基于閱歷，再結合近一兩年的監管趨向，我明天借聚美麗的平臺，和大家做下交流。

關于新規的公布，站在我們的角度來看，至少會惹起三方面的革新。首先，要求企業產品宣稱契合法規的基礎要求;其次，在產品設計尋求差異化時如何研收回更好的產品會成為全行業的思索;另外，宣稱上，要求企業樹立更好更高效的消費者和產品交互的言語。

而在做第三方成效評價的時分，需關注這四個基本的準繩——迷信性、真實性、牢靠性、可追溯性。企業自己評價項目也要契合這樣基本的要求。另外，還要樹立一個規范的實驗室，對報告的真實性停止擔任。

未來幾年，無論是實驗室方法，還是人體方法，尤其是在規范樹立的大背景下，會推停止業的規范和提高。

實驗室方法在化妝品成效評價中的運用：三層級、4M準繩

內行業里我們都有哪些可選擇的成效評價方法?

首先要強調的是，我覺得一個迷信的化妝品成效評價一定是多維度的。

目前行業里主要有三個層級。*個層級，細胞分子的相關目的。比如說做一個抗氧化的，需測一個ROS目的，而做一個抗皺的，可以做一個IV型膠原蛋白目的等，這就是一個單分子目的的檢測體系。

這里需求留意的是這個目的測試的結果與人體*終的成效差異多大是不確定的，這也是我們為什么鼓舞做多層級數據的緣由之一。

第二個層級，運用離體的組織，3D皮膚模型等，主要在組織維度的工具和方法上。基于這樣的體系，我們可以在形狀學上到達一站式的檢測，這樣可以把分子層面到真實的人體層面有更好的過渡。

第三個層級，在一些成效宣稱的方向上，提取一些人體方面的數據支撐。

另外，在全體的實驗室技術體系引見里，它需契合四個M的準繩，區分是機制 Mechanism、目的 Markers、模型 Models與方法 Methods。

機制 Mechanism：樹立皮膚成效形狀面前的細胞分子機制，由于我們做任何成效方向的評價、研討或許活性物選擇都脫離不開對特定成效方向機理上的研討。

目的 Markers：從不同皮膚形狀的發生機制失掉對應的檢測目的，用于反映皮膚成效的變化。

在機理研討層面上，會描寫出更易于檢測和實施的靶標，這些都是在方法學里十分關注的目的。在這個目的之下，我們需選擇適宜的模型。

模型 Models：依據皮膚形狀發生的機理，同時結合體外現有的基礎模型挑選*的造模條件。

那么模型選擇的依據是什么?首先模型Models要具有生理才干，第二模型需與評價對象的配伍和兼容。

方法 Methods：關于挑選的檢測目的，在組織、細胞、蛋白、基因等不同水平選擇對應的檢測方法開發與驗證。

我們會經過一些現代分子生物學的方法，以及理化的方法Methods，對它停止測定，全體上構成評價技術的基本體系。

體外方法在化妝品成效評價上的運用及案例

我們曾接觸到一家企業，他們有上百個特證產品，但是從未做過人體成效測試。這意味，他們產品賣了一兩年緩沖期之后便下架，面臨著重新開發新產品。但是我們知道法規規則的特證產品都是需求停止人體測試的，且行業那么大，產品這么多，有多少的比例是屬于概念性添加?

提到人體測試時，不少人對此沒決計。那么，在正式人體實驗之前，有沒有相關數據庫能先幫大家停止剖析等?接上去，我講一下——體外方法在化妝品成效評價上的運用及案例。

1、美白成效

有些公司有一定開發技術基礎如美白劑(具有一定的美白成效)等，如何停止體外的預篩，然后停止人體測試。

我們把產品涂抹在3D黑素皮膚模型的外表，經過一系列的目的，可以直觀看到產品運用后皮膚模型表觀顏色究竟是白還是黑了。另外也可以測定表觀亮度L值，黑素的散布和含量等相關目的。

我們來看一個詳細的案例，雅詩蘭黛專研光透煥白精髓素。

我們可以看到色度，在UVB組的照射下，抹了該產品之后，色度清楚比對照組要淡一些，這是十分直觀的美白效果，其他的量化目的也能證明這點。右下角的組織學里出現的黑素散布形狀，其結果不只可以通知我們這個產品的原理究竟是抑制黑素分解，還是抑制黑素的轉運;同時可得知，假設組織學結構十分完整的話，這個產品的平和性很高。這是我們在美白上的運用。

2、防脫成效

關于防脫產品的成效，行業的決計度是很低的，行業里也缺乏真正有效的防脫自然活性原料。只能尋覓更多自然或許中藥的提取物來處置這個效果，但是有一些原料雖有一定的成效，但是成效表現不夠冷艷。

從防脫機理來說，有三點。*5α恢復酶抑制劑;第二毛乳頭生臨時經過營養液調理;第三讓休止期的毛發重新進入生臨時。

另外從評價技術來看，可以與醫院協作——提取離體的毛囊，然后經過離體的毛囊，測生長毛囊的大小，還包括毛乳頭一些凋亡的狀況等。經過直觀的形狀學，再結合一些相關的因子表達，可以綜合地剖析待測的物質有沒有防脫成效。

當然還可以做更深層次的研討，比如H2O2-毛乳頭細胞(DPC)、DHT-毛乳頭細胞(DPC)，可以檢測到不同細化目的的毛乳頭細胞的表現狀況，這一體系不做詳細引見了。

回到防脫產品的開發狀況，我覺得*主要需求找到一個切入點。究竟是在生臨時處置營養性的、因子性的效果，還是休止期處置毛囊干細胞重新激活的效果，這是*步。

然后我們關于一個未知的提取物需結合網絡藥理剖析，一方面剖析這個原料物質能夠存在的靶向基因;另一方面是對標的疾病，包括防脫，以及面前調控的相關基因。如左邊這個圖，其實前端的任務，至少整合了雙邊幾千個基因做少量數據剖析。

如今來看一下詳細產品案例，是一個某烏發作發液。中心點主要是TGF-beta，AR，Wnt，PI3K-AKT這四個通路上。這里有一點要說明，假設有一個未知的物質，它的富集跟脫發相關，或許是抑制脫發相關的通路越多，它就更有能夠在真正的產品端起到防脫的成效。剖析完后，接上去可以做更多的延展性、細化的任務，這點是特別需求更多資源的投入。

這里有一個復雜的離體毛囊的培育，區分有四個組別，可以直觀看到在不同組別里毛發的生長的效果。另外也可在毛乳頭區域，看到它凋亡的狀況，像這個白色箭頭指示區域，過幾天這個毛發就會脫掉，如把這個現象抑制住，將會是一份十分直觀的檢測防脫成效的效果圖證明。

我們在直觀檢驗完之后，再配套產品的開發，從不同的通路停止包裝，以提升我們產品科技的屬性。

3、屏障修復

第三個案例，我想分享的是屏障修復和抗炎，也叫免疫調控。

從評價角度來看，有兩個中心的，一個是免疫調控，是治標的效果;一個是屏障修護，如何自動增強皮膚表層屏障，以及磚墻結構的恢復功用。

目前，我們匯總的活性物和產品，大致從機理上剖析，有三條主要的通路。*條是撫慰性反響，第二條是過敏性反響。中國無論是撫慰現象還是神經性招致的過敏現象，都會叫過敏，但臨床上，真正的過敏現象比例是較低的。第三是神經性的敏感。*近比擬火的像CBD，包括神經肽類，抑制神經遞質分泌的都是屬于這個類別。

所以從免疫調理角度來講，所觸及到的目的，都可以從原料和評價剖析作為切入點。

另外一個，屏障修復。假設我們對皮膚的分化結構停止細致剖析的話，屏障相關目的其實十分多，尤其EDC復合體，大約有65個基因左右，跟皮膚的屏障結構高度相關。此外，還有一些銜接蛋白、骨架蛋白/KIFs等。所以我們在這里所提取的目的，就不單單是可以作為我們原料的包裝點，也可以作為它的一個評價點。

舉個例子，這是基于3D的皮膚模型做的染色的結果。我們可以看到，在不同的處置方式之下，FLG、LOR，都會表現出不同的表達豐度，尤其在NC對照下，這個FLG、LOR表達就會有一個清楚下降。

還有前一段時間檢測的雪果精髓，經過SLS撫慰表皮模型發現：撫慰后表皮形狀會退步，同時分泌出一系列的炎癥因子，我們可以直觀地看見產品看對炎癥因子能否起到抑制造用，以及從免疫調控的角度來看產品的成效。

第二個方面，是FLG、LOR的CE屏障高度相關的蛋白質。可以看到陰性對照組，這個蛋白含量是降低的。加了這個產品之后，和陰性對照組比，有一個清楚性的提升。經過這樣的細分目的可以說明這個產品具有屏障自動修復的成效，而且和臨床的正常皮膚屏障自動修復的相關性也是比擬高的。

4、抗衰老

在抗皺方面，主要觸及到三個主要工具，成纖維細胞、體外重組全層皮膚模型、離體皮膚組織。其中離體皮膚組織，化妝品可以在表皮上直接停止涂抹，這樣可觀察它全體的皮膚變化。

但這個技術體系有個難點，主要是臨時培育。這個產品在相對長的時間里，看它對皮膚究竟發生什么樣的變化。首先我們要優先保證離體皮膚在體外可以維持兩周以上的生長培育，但正常的細胞三天便片面地凋亡。

結合現有豐厚的相關目的、檢測模型，可以挑選用哪個活性物作為我們的配方。

首先需做個初篩，這個初篩主要基于一些高性價比細胞模型，經過這個目的可以看到MMP和ROS抑制效果比擬好，然后停止組合。

另外一些可視化的結果，像膠原的分泌，可以協助我們確定特定的原料以及它的成效。詳細到產品，我們也會用到相關相似的方法，像剛才提到的ROS、MMP、COL1，還有一些更重要的，我們會用三維的效果，來看它在組織形狀上有什么綜合的表現。

這是我們前一段時間接觸的含視黃醇類的抗皺修復產品。這個產品經過組織學比擬，與陰性對照組對比，可看到實驗組表皮層增厚，這跟視黃醇的一些基礎功用相關。第二看結構，比如I型膠原蛋白，表達豐度有沒有提高。我們知道在衰老皮膚中，DEJ結構退步比擬嚴重的。

異樣我們也可在膠原纖維的染色密度上作比擬，左邊這個膠原散布密度圖，遠遠高于陰性對照組，還可在彈性纖維表達散布上停止相關的檢測。這樣的檢測結果更有利佐證產品在抗皺上的成效，同時也可以作為與其它產品差異化的成效包裝。

說到差異化，行業里普遍用美白、保濕、控油等統稱，所以我們應該思索如何停止更好的差異化宣稱。首先差異化的宣稱，它是為一級宣稱效勞的，我們可以衍生出更好的市場故事。比如修護，可用水潤修復;其次把水潤的相關目的停止迷信的關聯。第三把配方原料里的目的停止檢測。這樣一個逐層的邏輯，做到詳細的實測目的，然后再倒推，經過這樣的證據數據支持，來驗證水潤修復效果。

所以整集體系對皮膚分子機制的驗證，細胞的靶向，包括婚配的原料和產品，是一個系統化的工程，這樣可以到達差異化宣稱的目的。

從全體下去看，化妝品成效的評價、成效產品的開發，都是從皮膚的生物學目的末尾的。

我覺得這是一個新的時代，對我們做技術的人員來講，是十分好的鼓舞。而這個生物目的，中間需求多維度的成效評價方法停止銜接，目前沒有一個獨立的成效評價方法來處置所遇到的效果。

忠于消費者的體驗，把消費者的價值*化。雖然這外面觸及到方方面面的迷信，但我置信把全行業整合起來，可以帶來龐大的提高。

博 溪生物不時在一線，專注于系列3D皮膚模型開發和產業化，專業聚焦于化妝品、口腔護理、發用品以及嬰幼兒護理等產品的平安與成效評價，十分快樂無時機和大家分享我們的閱歷，謝謝大家。